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一步法RT-qPCR試劑盒

Biomarker One Step SYBR Green RT-qPCR Kit

產品信息

Biomarker One Step SYBR Green RT-qPCR Kit

目錄:RK02012

規格:250 RXN (20 μL/RXN)

運輸方式:干冰運輸。

保存方式:-20?℃避光保存,本產品避免反復凍融。

產品介紹

百邁客推出的一步法RT-qPCR試劑盒(Biomarker?One Step SYBR Green RT-qPCR Kit),實現在同一個管中,一步完成從反轉錄到定量PCR的全部反應。以RNA為模板,使用基因特異性引物,在BiomarkerScript?II One Step Enzyme Mix作用下,高效合成第一鏈cDNA。再以cDNA為模板,在2×One Step SYBR Green RT-qPCR?Buffer作用下,配合優化的緩沖體系(緩沖體系中添加了有效抑制非特異性PCR擴增的組分和提高擴增能力的促進因子),對高/低豐度的目的基因進行精準定量擴增,該試劑盒重復性好,可信度高。

圖1:不同儀器所需ROX Reference Dye不同,請參考上述機型。

  • 操作簡單

    一次加樣,可完成cDNA合成和定量PCR實驗,同時避免了樣本交叉污染。

  • 靈敏度較高

    緩沖體系中添加了提高擴增能力的促進因子,可檢測低至10 pg的總RNA。

  • 特異性較強

    預混液中添加了有效抑制非特異性擴增的組分,可抑制引物二聚體的產生,定量更精準。

  • 卓越的擴增性能

    良好的線性關系,擴增效率高達99%,且重復性高。

  • 適用所有機型

    試劑盒中有獨立包裝的的ROX I和ROX II、可用于校正孔與孔之間產生的熒光信號誤差。

部分實驗數據

(以下RNA模板,均是用百邁客微量動物組織RNA提取試劑盒提?。?/p>

1.靈敏度檢測:均以小鼠肝臟RNA為模板,設置不同的濃度梯效率可達99.1%,10 pg的RNA模板也完全可以擴增。

 

圖2:以10 μg-10?pg小鼠肝臟總?RNA為模板,擴增?GAPDH基因。結果發現:線性范圍可達7個數量級,靈敏度可達?10?pg測分析。

2.重復性檢測:分別設置30個復孔,擴增相同的基因,發現擴增曲線的Ct值幾乎一致。

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圖3:以100 ng小鼠肝臟總?RNA為模板,設置30個復孔,擴增β-actin基因,擴增重復率高。

3.物種多樣性檢測:分別以多種動、植物的RNA為模板,進行定量分析。發現所有的樣本對應的目的完全片段,均成功擴增出來。

 

圖4:物種多樣性檢測:分別以不同物種、不同濃度的RNA為模板,進行一步法RT-qPCR擴增。包括人肝癌(藍色);果蠅(綠色);小鼠腸道(黑色);番茄果(紅色);日本水稻(紫色);辣椒(橙色);石斑魚(灰色)。

產品組分

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