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反轉試劑盒

BiomarkerScript Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit

?產品信息

Biomarker Script Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit

目錄: RK02002

規格: 100 RXN

?產品介紹

BiomarkerScript Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit是一款專門用于反轉錄實驗的試劑盒,包含了BiomarkerScript II逆轉錄酶和兩種逆轉錄的引物。

BiomarkerScript II逆轉錄酶是一種重組M-MuLV逆轉錄酶,擁有較低的RNase H活性同時兼具增強的熱穩定性。與野生型M-MuLV相比,重組M-MuLV逆轉錄酶可以在更高的溫度下合成第一鏈cDNA。該酶在高達48?℃時仍具有活性,特異性和cDNA產量更高。

?運輸與保存條件

運輸方式:干冰運輸。

保存方式:-80~-20℃避光保存。

?產品特點

  • 廣泛的模板兼容性

可兼容不同物種,包括動物(小鼠、人、雞、鴿子等)、植物(玉米、水稻、番茄等)樣本。

  • 熱穩定性

BiomarkerScript II逆轉錄酶是一種重組M-MuLV逆轉錄酶,擁有較低的RNaseH活性同時兼具增強的熱穩定性。

圖1:以1 μl人肝癌細胞RNA為模板,用BiomarkerScript Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit進行逆轉錄,得到cDNA產物。再以100 ng cDNA為模 板,用Biomarker HS 2× HF Master Mix進行PCR擴增,將得到的產物進行瓊脂糖凝膠電泳.

結果所示:擴增條帶單一且產量高。

  • 高反轉錄酶的活性

該酶在高達48 ℃時仍具有活性,而且特異性和cDNA產量更高。較高溫度下進行反轉錄,

能夠減少RNA的二級結構,增加反轉錄的效率。

  • 擴增更長cDNA

BiomarkerScript Ⅱ 1st Strand cDNA Synthesis Kit可擴增長達10 kb的cDNA,用于基因克隆。

?產品組分

V = A, G or C;N = A, G, C or T **Contains 1 mM dNTP. 注:將所有試劑儲存在-20 ℃。

?產品應用

1.cDNA第一鏈的合成。

2.反轉產物適用于qPCR實驗。

3.反轉產物適用于基因克隆。

4.cDNA文庫構建。

?分子試劑+測序應用場景?

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FAQ

Q1:cDNA產量低?

A1: 1)模板RNA降解,或者濃度過低。通過變性瓊脂糖凝膠電泳檢查RNA的完整性。

2)小分子化合物污染RNA模板??梢砸掖汲恋?,然后70%乙醇洗滌可以除去大多數污染物,例如EDTA和胍類;用氯化鋰沉淀可以去除多糖。

3)蛋白污染RNA模板。苯酚/氯仿提取和乙醇提取可以去除蛋白污染,如蛋白酶。一些靶RNA可能包含RT的強終止序列。

4)建議使用隨機引物而不是d(T)23VN。

Q2:mRNA可以用于逆轉錄反應嗎?

A2: 總RNA或mRNA都可用于逆轉錄反應,通??俁NA足以進行大多數RT-PCR分析。

 

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